Wpływ łagodnej hipertermii na morfologię, ultrastrukturę i organizację F- Aktyny w komórkach linii HL-60

Abstrakt

Wstęp. Hipertermia jest dynamicznie rozwijającą się metodą lecznia nowotworów, stosowaną w skojarzeniu z radio- i/lub chemioterapią. Precyzyjny mechanizm działania hipertermii na poziomie komórkowym nie został, jak dotąd w pełni poznany i wydaje się on wielowymiarowy. Celem niniejszej pracy była analiza wpływu łagodnej hipertermii na organizację filamentów aktynowych w komórkach linii HL-60. Za zasadną uznano także ocenę zmian morfologicznych i ultrastrukturalnych wywołanych przez hipertermię, celem określenia rodzaju uruchamianej śmierci zachodzącej w badanej linii.

Materiały i metody . Badania przeprowadzono na komórkach linii białaczki promielocytowej HL-60. Filameny aktynowe wyznakowano falloidyną skoniugowaną z Alexa Fluor® 488 i oglądano w mikroskopie fluorescencyjnym. Morfologiczne i ultrastrukturalne zmiany w komórkach oceniono odpowiednio, przy użyciu mikroskopu świetlnego oraz transmisyjnego mikroskopu elektronowego.

Wyniki. W wyniku ekspozycji komórek HL-60 na podwyższoną temperaturę obserwowano reorganizację cytoszkieletu aktynowego oraz pojawienie się komórek o cechach charakterystycznych dla procesu apoptozy, takich jak obkurcznie cyto- i nukleoplazmy, kondensacja i marginalizacja chromatyny czy obrzmienie mitochondriów. W wyniku rearanżacji, F-aktyna lokalizowała sie głównie w części korowej komórki w formie pierścienia lub w cytoplazmie w postaci wyraźnie wyznakowanych sieci i skupień. Stopień nasilenia zmian w komórkach wzrastał wraz ze wzrostem czasu regeneracji komórek.

Wnioski. Uzyskane wyniki pozwalają stwierdzić, że cytoszkielet aktynowy zaangażowany jest w realizację procesu apoptozy indukowanej przez łagodną hipertermię. Ponadto sugerują one, że na wystąpienie zmian w organizacji filamentów aktynowych, jak również zmian w morfologii i ultrastrukturze komórek ma wpływ, nie tylko zastosowany profil temperaturowy, ale również czas regeneracji komórek.